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塵埃粒子計(jì)數(shù)器知識(shí)大合集

發(fā)布日期:2022-04-26      瀏覽次數(shù):1540

 

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路美新創(chuàng)--微生物限度儀小知識(shí)


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    微生物限度儀是依據(jù)藥典相關(guān)規(guī)定設(shè)計(jì)制造的微生物檢測(cè)檢查專用設(shè)備,以負(fù)壓抽濾的方式達(dá)到微生物截留的目的,該產(chǎn)品使用高性能隔膜泵,直接排液,無需抽濾瓶;用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,隨意使用,既能降低成本,也可方便快捷地達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>通過不同濾頭配合專用的濾杯或檢測(cè)培養(yǎng)器,形成完整的薄膜過濾裝置。

    檢測(cè)時(shí)將供試液通過薄膜過濾,將試液內(nèi)的微生物截留在濾膜上,經(jīng)培養(yǎng)形成肉眼可見的菌落并進(jìn)行計(jì)數(shù),以檢測(cè)供試品內(nèi)的含菌量。此類產(chǎn)品適用于醫(yī)療,生物,藥品、食品,化妝品,化工行業(yè)對(duì)產(chǎn)品或純化水的微生物檢測(cè),同時(shí)也可對(duì)實(shí)驗(yàn)室中相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行除菌、除微粒等操作


 

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PART1

關(guān)于微生物的作用和生存環(huán)境

Q:微生物的作用和生存環(huán)境有哪些?

作用

食物鏈物質(zhì)鏈

食品工業(yè)生態(tài)群落 

制藥工業(yè)(疫苗、抗生素).......


生存環(huán)境

√土壤,空氣,水體 

某些惡劣條件

-海底 

-死海 

-撒哈拉沙漠 

-極地(—88℃)

-火山口的溫泉(+98℃)

-原油礦床

微生物幾乎無處不在

PART2

關(guān)于微生物限度檢測(cè)

Q: 微生物限度檢測(cè)方法? 

   初始污染菌:產(chǎn)品消毒、滅菌前的細(xì)菌總數(shù),可判斷檢品售細(xì)菌污染的程度以及生產(chǎn)單位所用的原料、工具設(shè)備、工藝流程、生產(chǎn)人員的衛(wèi)生狀況,是對(duì)檢品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)的綜合依據(jù)。

PART3

關(guān)于微生物計(jì)數(shù)法

Q:微生物計(jì)數(shù)法有哪些?

 檢查非規(guī)定滅菌產(chǎn)品售微生物污染程度的方法

 微生物計(jì)數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細(xì)菌和真菌的計(jì)數(shù)。

 當(dāng)本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時(shí),應(yīng)按下述規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn),包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。除另有規(guī)定外,本法不適用于活菌制劑的檢查。

 計(jì)數(shù)方法包括平皿法、薄膜過濾法和最可能數(shù)法(Most-Probable-Number Method,簡稱MPN法)。MPN法用于微生物計(jì)數(shù)法時(shí)精確度較差,但對(duì)于某些微生物污染量很小的供試品,MPN法可能是更適合的方法。

 供試品檢查時(shí),應(yīng)根據(jù)供試品理化特性和微生物限度標(biāo)準(zhǔn)等因素選擇計(jì)數(shù)方法,檢測(cè)的樣品量應(yīng)盡能保證所獲得的試驗(yàn)結(jié)果能夠判斷供試品是否符合規(guī)定。所選方法的適應(yīng)性須經(jīng)確認(rèn)。            

PART4

關(guān)于初始污染菌檢測(cè)有哪些?

Q: 初始污染菌檢測(cè):環(huán)境、設(shè)備、試劑、培養(yǎng)基有哪些?

環(huán) 境:微生物計(jì)數(shù)試驗(yàn)環(huán)境應(yīng)符合微生物限度檢查的要求。檢驗(yàn)全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。潔凈空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)。(參考無菌檢查法對(duì)環(huán)境的要求)

設(shè) 備:微生物限度儀(微生物過濾裝置)、菌落計(jì)數(shù)器(如需要)

試   劑:沖洗液等同無菌檢查法。

培養(yǎng)基:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA

           沙氏葡萄糖   

           瓊脂培養(yǎng)基(SDA

菌   株:金黃色葡萄球菌CCMCC(B)26003   

           銅綠假單胞菌CMCC(B)10104

         枯草芽孢桿菌CMCC(B)63501     

         白色念珠菌CMCC(F)98001

    黑曲霉CMCC(F)98003             

    大腸埃希菌CMCC(B)44102

PART5

關(guān)于供試液制備原則

Q: 供試液的制備原則有哪些?

根據(jù)供試品的理化特性與生物特性,采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時(shí),應(yīng)均勻加熱,契溫度不應(yīng)超過45℃。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基,不得超過1小時(shí)。樣品浸提時(shí),所用緩沖液應(yīng)沒過樣品頂端,使得樣品被*浸沒。

PART6

關(guān)于常用供試液制備方法

Q: 常用供試液制備方法有哪些?

(如果下列供試液制備方法經(jīng)確認(rèn)均不適用,應(yīng)建立其他適宜的方法)

1)水溶性供試品:

取供試品,用PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液,或PH7.2磷酸鹽緩沖液,或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)提液基溶解或稀釋制成110供試液。若需要,調(diào)節(jié)供試液PH值至6-8.必要時(shí),用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液

(2)水不溶性非油脂類供試品:

取供試品,用PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液,或PH7.2磷酸鹽緩沖液,或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基制備成110供試液。分散力較差的供試品,可在稀釋液中加入表面活性劑如0.1%ml/ml)的聚山梨酯80,使供試品分散均勻。若需要,調(diào)節(jié)供試液PH值至6-8.必要時(shí),用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。

(3)油脂類供試品:

取供試品,加入無菌十四烷酸異丙酯使得=溶解,或與少量并能使供試品乳化的無菌聚山梨酯80或其他無抑菌性的無菌表面活性劑充分混勻。表面活性劑的溫度一般不超過40℃(特殊情況下,最多不超過45℃),小心混合,若需要可在水浴中進(jìn)行,然后加入預(yù)熱的稀釋液使成110供試液,保溫,混合,并在最短時(shí)間內(nèi)形成乳狀液。必要時(shí),用稀釋液或含上述表面活性劑的稀釋液進(jìn)一步10倍系列稀釋。

(4)膜劑供試品:

取供試品,剪碎,加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液,或PH7.2磷酸鹽緩沖液,或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基,浸泡,振搖,制成110的供試液。若需要,調(diào)節(jié)供試液PH值至6-8.必要時(shí),用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。

PART7

關(guān)于抗菌活性的去除或滅活

Q:菌活性的去除或滅活分別是哪些?

 供試液接種后,按下列“微生物回收"規(guī)定的方法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。若試驗(yàn)組菌落數(shù)減去供試品對(duì)照組菌落數(shù)的值小于菌液對(duì)照組菌落數(shù)值的50%,可采用下述方法消除供試品的抑菌活性。

(1)增加稀釋液或培養(yǎng)基體積

(2)加入適宜的中和劑或滅活劑

(3)采用薄膜過濾法

(4)上述幾種方法的聯(lián)合適用

若沒有適宜消除供試品抑菌活性的方法,對(duì)特定試驗(yàn)菌回收的失敗,表明供試品對(duì)該試驗(yàn)菌具有較強(qiáng)抗菌活性,同時(shí)也表明供試品不易被該類微生物污染。但是,供試品也可能僅對(duì)特定試驗(yàn)菌株具有抑制作用,而對(duì)其他菌沒有抑制作用。因此,根據(jù)供試品須符合的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)和菌數(shù)報(bào)告規(guī)則,在不影響檢驗(yàn)結(jié)果判斷的前提下,應(yīng)采用能使微生物生長的更高稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)。若方法適用性試驗(yàn)符合要求,應(yīng)以該稀釋級(jí)供試液作為低稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行供試品檢查。

PART8

關(guān)于微生物限度檢測(cè)--供試品監(jiān)檢查--平皿法

Q: 微生物限度檢測(cè)---供試品監(jiān)檢查---平皿法?

 平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外,取規(guī)定量供試品,按方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和菌數(shù)測(cè)定,每稀釋級(jí)每種培養(yǎng)基至少制備2個(gè)平板。

 培養(yǎng)和計(jì)數(shù):除另有規(guī)定外,胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在30~ 35℃培養(yǎng)3~ 5天,沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板在20~ 25~C培養(yǎng)5~ 7天,觀察菌落生長情況,點(diǎn)計(jì)平板上生長的所有菌落數(shù),計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后,計(jì)算名稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù),按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落數(shù)平均值不小于15 ,則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。

 菌數(shù)報(bào)告規(guī)則: 需氧菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于300cfu的稀釋級(jí)、霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu的稀釋級(jí),作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。取最高的平均菌落數(shù),計(jì)算1g、1ml或10cm2供試品中所含的微生物數(shù),取兩位有效數(shù)字報(bào)告。

 如各稀釋級(jí)的平板均無菌落生長,或僅低稀釋級(jí)的平板有菌落生長但平均菌落數(shù)小于1時(shí),以< 1乘以低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。

PART9

關(guān)于微生物限度檢測(cè)--供試品檢查--薄膜過濾法

Q:微生物限度檢測(cè)---供試品檢查---薄膜過濾法?

  除另有規(guī)定外,按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備。取相當(dāng)于1g、 Iml10cm2供試品的供試液,若供試品所含的菌數(shù)較多時(shí),可取適宜稀釋級(jí)的供試液,照方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法加至適量稀釋液中,立即過濾,沖洗,沖洗后取出濾膜,菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。

培養(yǎng)和計(jì)數(shù):培養(yǎng)條件和計(jì)數(shù)方法同平皿法,每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過100cfu。

菌數(shù)報(bào)告規(guī)則:以相當(dāng)于1g、1ml或10cm2供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù);若濾膜上無菌落生長,以< 1報(bào)告菌數(shù)每張濾膜過濾1g、1ml或10cm2供試品),或< 1乘以低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。

PART10

關(guān)于微生物限度檢測(cè)--結(jié)果判斷

Q:微生物限度檢測(cè)--結(jié)果判斷?

  氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)(包括真菌菌落數(shù));霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)(包括細(xì)菌菌落數(shù))。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌使霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)結(jié)果不符合微生物限度要求,可使用含抗生素(如氯霉素、慶大霉素)的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基(如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基)進(jìn)行霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。使用選擇性培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。若采用MPN,測(cè)定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。 

各品種項(xiàng)下規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下: 

10cfu:可接受的最大菌數(shù)為20; 

100cu可接受的最大菌數(shù)200;

1000f:可接受的最大菌數(shù)為2000, 依此類推。 

若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總教的檢查結(jié)果均符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定,判斷供試品符合規(guī)定;若其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定,判供試品不符合規(guī)定。

PART11

關(guān)于微生物限度檢測(cè)--純化水微生物限度檢測(cè)

Q:純化水微生物限度檢測(cè)方法?

檢測(cè)方法取本品不少于1ml,經(jīng)薄膜過濾法處理,采用R2A瓊脂培養(yǎng)基,30~35°C培養(yǎng)不少于5天,依法檢查(通則1105),1ml供試品中需氧菌總數(shù)不得過100cfu.


培養(yǎng)基: R2A瓊脂培養(yǎng)基


 

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